银耳多糖在肝癌治疗中的作用及相关机制的实验研究

目的研究银耳多糖(Tremella Polysaccharide TP)对荷HAC小鼠T细胞表面分化抗原、细胞因子、体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的影响.方法用环磷酰胺和银耳多糖分别作用于荷HAC肝癌小鼠,采用免疫荧光法、流式细胞仪及酶标仪观察各组免疫功能的变化及细胞因子的表达,并分离其脾细胞,将诱导的细胞毒性T细胞(CTL细胞)分别作用于体外培养的3H-TdR标记的肿瘤细胞P815,HAC和B16,4 h后用γ-闪烁记数仪进行检测,并计算杀伤程度.检测各组肿瘤质量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变.结果银耳多糖实验组总T细胞、T杀伤细胞及肿瘤坏死因子(TNF)高于对照组,其中对总T细胞及TNF上调明显.在对HAC,P815,B16肿瘤细胞的杀伤作用中,银耳多糖实验组的杀伤活性明显高于对照组,分别为23.85%,20.81%,25.43%,P<0.01,其中对B16杀伤作用最强,HAC次之,P815最弱.环磷酰胺 银耳多糖实验组上述指标与银耳多糖实验组相比有所下降,但与对照组相比则明显增高(P<0.05).治疗组肝肿瘤质量、体积均低于模型组.组织学上肿瘤坏死程度重且范围广,淋巴细胞、巨噬细胞浸润明显,纤维组织增生显著.环磷酰胺组较实验组表现的更为明显.银耳多糖实验组除脾脏外,其他主要脏器无明显形态学变化.结论银耳多糖具有激活和提高特异性和非特异性杀伤细胞的抗肿瘤作用,是一种能调节机体免疫功能、抑制肿瘤细胞增殖、分化的抗癌中药制剂.     

发酵法生产银耳孢子多糖放大过程的工艺研究

本文报道了银耳孢子多糖产生菌株 TS907·5继摇瓶发酵条件研究后所进行的700L 和2500L 通用发酵罐放大试验及其互艺条件的研究结果。试验表明,提高底物葡萄糖浓度和供氧强度的合理控制对提高银耳孢子多糖的累积量非常重要。在所获得的工艺条件下,2300L 发酵罐稳产试验的银耳孢子多糖产率平均可达12g/L,最高18.7g/L。发酵液中银耳孢子多糖的提取收效平均为8.33g/L 最高可达20.0g/L。银耳孢子多糖粉质量符合食品企业标准 Q/CYD03—92。本文也对试验结果进行了分析与讨论。     

银耳浸提液作为稳定剂制作奶饮料的效果

采用酶浸提法和热水浸提法,研究了银耳浸提液的提取工艺。结果表明:酶法浸提银耳的最适条件为:加水量1∶50,加入银耳粉重1%的果胶酶,置于45℃水浴锅中恒温酶解45min,然后迅速升温至98℃灭酶,并保温浸提60min。利用银耳浸提液代替人工合成稳定剂制作奶饮料,银耳浸提液添加量为奶饮料总量的30%时,按奶饮料的生产工艺,可代替羧甲基纤维素钠、黄原胶和海藻酸丙二醇酯等稳定剂的稳定与增稠作用。制品稳定性好,且具有银耳的保健功能。     

银耳孢子发酵饮料保存力研究

本文以银耳孢子发酵饮料为例,研究了营养饮料在四种试验条件下的保存力,提出凡是自身组成不含防腐成分的营养饮料,都应适量添加防腐剂,才能达到国家卫生部规定的3～6个月保存期,并从微生物学原理加以阐明。此结论适宜在各类新食品研制中推广应用。     

IL-2联合银耳多糖激活的同种脾细胞对肝癌实验性治疗的研究

目的研究淋巴因子IL-2联合银耳多糖(Tremella Polysaccharide TP)共同激活的小鼠脾细胞对体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的治疗作用.方法将IL-2激活的小鼠脾细胞(即LAK细胞)和IL-2与银耳多糖协同激活的小鼠脾细胞(即TP-LAK细胞)分别作用于体外培养的3H-TdR标记的肿瘤细胞P815,H22和B16,2h后用γ-闪烁计数仪进行检测,并计算杀伤程度.将上述激活的小鼠脾细胞在小鼠荷肝癌局部皮下注射,隔日1次,共5次.检测肿瘤质量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变.结果 IL-2与银耳多糖激活的小鼠脾细胞对体外培养的肿瘤细胞有明显的杀伤作用,2种效应细胞对B16杀伤作用最强,H22次之,P815最弱,TP-LAK细胞的作用较之LAK细胞更强,P<0.05.治疗组肝肿瘤质量、体积均低于对照组.组织学上肿瘤坏死程度重且范围广,淋巴细胞、单核细胞浸润明显,纤维组织增生明显.银耳多糖协同IL-2实验组较单纯的IL-2实验组表现得更为明显.除脾脏外,其他主要脏器无明显形态学变化.结论 IL-2激活脾LAK细胞是有效的抗肝癌细胞,IL-2 与银耳多糖在活化脾细胞提高抗肿瘤方面具有协同作用.其对体内主要脏器无明显影响.     

银耳双核菌丝隔膜孔帽的超微结构

在银耳（Ｔｒｅｍｅｌｌａｆｕｃｉｆｏｒｍｉｓ）双核菌丝隔膜孔器超微结构的研究中，发现银耳孔帽分子横切时为两平行条形，而不是环形。只有折叠片层体的横切面才呈两平行条形，纵切面呈Ｕ形，如果斜—纵切折叠片层体的基部则为开口环形（其实是Ｕ形）。因此，作者认为圆顶形孔帽不是由许多杯状体组成，而是由众多折叠片层体组成。为了说明银耳型多单位的折叠片层体孔帽不同于单一单位的括孤体孔帽，特把银耳型的隔膜孔器命名为桶孔／叠层体隔膜（ｄｏｌｉｐｏｒｅ／ｌａｍｉｎａｔｅｓｏｍｅｓｓｅｐｔｕｍ），以区别于其他担子菌的桶孔／括弧体隔膜（ｄｏｌｉｐｏｒｅ／ｐａｒｅｎ－ｔｈｅｓｏｍｅｓｅｐｔｕｍ）。     

金耳水溶性多糖的部分化学性质及抑瘤试验

金耳子实体经热水抽提，反复经Ｓｅｖａｇ法脱蛋白，获得金耳多糖，Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ分级分离呈现双峰（Ａ和Ｂ）。其峰Ａ的相对分子质量介于１０＾５￣１０＾６之间。峰Ａ组分经醋酸纤维薄膜电泳鉴定，呈现单一谱带，为一纯多糖。利用硅胶Ｇ薄板层析技术，确定峰Ａ组分主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖组成。利用人肺腺癌裸小鼠模型ＬＡＸ－８３对金耳多糖全组分进行抑瘤试验，结果表明有明显抑瘤疗效。     

金耳多糖注射剂中多糖的含量测定

建立金耳多糖注射剂中的多糖含量测定方法。采用3,5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)对注射剂中多糖进行含量测定,样品经DNS试剂显色后于499 nm处测定吸收度,在此波长处溶液的吸光度与葡萄糖含量呈良好线性关系;回归方程为:A=0.0272 0.7016C,r=0.9996(n=7);平均加样回收率为100.7%,RSD=1.9%。DNS法用于测定多糖含量简单易行、快速可靠,可用于该注射剂的质量控制。     

低糖型金耳饮料口感调配研究初探

以金耳发酵液为主要原料，用木糖醇和低聚异麦芽糖作甜味剂，柠檬酸为酸味剂制成低糖型金耳饮料并进行口感调配。经正交试验，当添加木糖醇5．0％、低聚异麦芽糖3．5％、柠檬酸0．10％时产品口感较佳。且还原糖含量仅为0．52％。